麥胚活性肽的制備、功能特性及應(yīng)用

第1章  麥胚活性肽概述 001
1.1  活性肽（氨基酸、肽與蛋白質(zhì)） 001
1.2  活性肽制備 003
1.2.1  肽的制備 003
1.2.2  肽的分離和純化方法 008
1.3  麥胚活性肽的功能 010
1.3.1  麥胚活性肽與抗氧化活性 011
1.3.2  麥胚活性肽與糖脂代謝 013
1.3.3  麥胚活性肽與成骨活性 015
1.3.4  麥胚活性肽與抗炎活性 016
1.3.5  麥胚活性肽與抗癌活性 017
1.3.6  麥胚活性肽與腸道菌群 018
參考文獻(xiàn) 019
第2章  麥胚活性肽制備與鑒定 027
2.1  麥胚清蛋白提取與鑒定 027
2.1.1  脫脂麥胚粉的制備 027
2.1.2  清蛋白提取單因素實(shí)驗 028
2.1.3  清蛋白提取正交實(shí)驗 029
2.1.4  清蛋白含量測定 030
2.2  酶解法制備麥胚活性肽工藝優(yōu)化與純化 031
2.2.1  酶解法制備麥胚活性肽Ⅰ工藝優(yōu)化與純化 031
2.2.2  酶解法制備麥胚活性肽Ⅱ工藝優(yōu)化與純化 037
2.3  麥胚活性肽的結(jié)構(gòu)鑒定 050
2.3.1  麥胚活性肽Ⅰ結(jié)構(gòu)鑒定 050
2.3.2  麥胚活性肽Ⅱ結(jié)構(gòu)鑒定 054
本章小結(jié) 057
參考文獻(xiàn) 057
第3章  麥胚活性肽改善氧化應(yīng)激的作用及機(jī)制 060
3.1  麥胚活性肽體外抗氧化性研究 060
3.1.1  麥胚活性肽氧自由基吸收能力 060
3.1.2  麥胚活性肽ABTS ·清除能力 062
3.1.3  麥胚活性肽DPPH ·清除能力 064
3.2  麥胚活性肽抗細(xì)胞氧化應(yīng)激的作用 066
3.2.1  麥胚活性肽對H2O2誘導(dǎo)的VSMCs氧化應(yīng)激的抑制作用 066
3.2.2  麥胚活性肽對H2O2誘導(dǎo)的HepG2氧化應(yīng)激的抑制作用 070
3.3  麥胚活性肽抗2型糖尿病小鼠體內(nèi)氧化應(yīng)激的作用 073
3.3.1  麥胚活性肽對STZ小鼠血糖的影響 073
3.3.2  麥胚活性肽對糖尿病小鼠主動脈異常增殖的作用 074
3.3.3  麥胚活性肽對糖尿病小鼠保護(hù)作用可能的機(jī)制 075
3.3.4  麥胚活性肽對糖尿病小鼠肝臟中T-AOC和SOD水平的影響 076
3.3.5  麥胚活性肽對糖尿病小鼠肝臟中MDA水平的影響 077
3.3.6  麥胚活性肽對糖尿病小鼠血清中炎癥因子水平的影響 078
3.4  麥胚活性肽抗氧化應(yīng)激作用機(jī)制 079
3.4.1  麥胚活性肽對NOX4表達(dá)的影響 079
3.4.2  麥胚活性肽對PKCζ磷酸化水平的影響 081
3.4.3  麥胚活性肽對AMPKα磷酸化水平的影響 081
3.4.4  抗氧化肽對AMPK的激活作用 082
本章小結(jié) 083
參考文獻(xiàn) 083
第4章  麥胚活性肽對2型糖尿病的改善作用 087
4.1  活性肽治療糖尿病研究現(xiàn)狀 087
4.2  麥胚活性肽對胰島素抵抗的作用 088
4.2.1  IR-HepG2模型的建立 088
4.2.2  麥胚活性肽的篩選 090
4.2.3  麥胚活性肽對糖原含量的影響 092
4.2.4  麥胚活性肽對HK、PK的影響 094
4.3  麥胚活性肽對2型糖尿病大鼠病癥的改善作用 094
4.3.1  麥胚活性肽對大鼠基礎(chǔ)生理指標(biāo)的影響 095
4.3.2  麥胚活性肽對大鼠胰島素抵抗指數(shù)的影響 096
4.3.3  麥胚活性肽對大鼠血漿脂質(zhì)指標(biāo)的影響 099
4.3.4  麥胚活性肽對大鼠肝臟糖原含量的影響 101
4.3.5  麥胚活性肽對大鼠肝臟HK、PK的影響 101
4.4  麥胚活性肽治療2型糖尿病機(jī)制 102
4.4.1  麥胚活性肽對胰島素信號通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響 103
4.4.2  麥胚活性肽對糖代謝相關(guān)蛋白表達(dá)的影響 105
4.4.3  麥胚活性肽對大鼠肝臟脂代謝相關(guān)蛋白表達(dá)的影響 110
本章小結(jié) 114
參考文獻(xiàn) 114
第5章  麥胚活性肽延緩老年性骨質(zhì)疏松的作用及機(jī)制 118
5.1  活性肽對骨質(zhì)疏松作用的現(xiàn)狀 119
5.2  麥胚活性肽ADW對氧化應(yīng)激環(huán)境中共育體系下成骨和破骨細(xì)胞活性的影響 120
5.2.1  OB-OC共育體系下氧化應(yīng)激模型的構(gòu)建 120
5.2.2  麥胚活性肽ADW對H2O2誘導(dǎo)的共育體系下成骨細(xì)胞氧化應(yīng)激水平的影響 123
5.2.3  麥胚活性肽ADW對H2O2誘導(dǎo)的共育體系下成骨細(xì)胞增殖活性的影響 125
5.2.4  麥胚活性肽ADW對H2O2誘導(dǎo)的共育體系下成骨細(xì)胞分化活性的影響 126
5.2.5  麥胚活性肽ADW對H2O2誘導(dǎo)的共育體系下成骨細(xì)胞凋亡的影響 128
5.2.6  麥胚活性肽ADW對H2O2誘導(dǎo)的共育體系下破骨細(xì)胞分化的影響 129
5.3  麥胚活性肽ADW對老年性大鼠骨質(zhì)疏松的作用 130
5.3.1  麥胚活性肽ADW對老年大鼠血清骨重建指標(biāo)的影響 130
5.3.2  麥胚活性肽ADW對老年大鼠氧化應(yīng)激指標(biāo)的影響 131
5.3.3  麥胚活性肽ADW對老年大鼠股骨形態(tài)計量學(xué)的影響 133
5.3.4  麥胚活性肽ADW對老年大鼠股骨微觀結(jié)構(gòu)的影響 133
5.3.5  麥胚活性肽ADW對老年大鼠股骨成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞分化活性的影響 136
5.4  麥胚活性肽ADW對骨穩(wěn)態(tài)失衡的作用機(jī)制 138
5.4.1  麥胚活性肽ADW對老年骨質(zhì)疏松大鼠成骨細(xì)胞增殖活性的影響 138
5.4.2  麥胚活性肽ADW對老年骨質(zhì)疏松大鼠成骨細(xì)胞分化活性的影響 138
5.4.3  麥胚活性肽ADW對老年骨質(zhì)疏松大鼠成骨細(xì)胞凋亡的影響 140
5.4.4  麥胚活性肽ADW對H2O2誘導(dǎo)的共育體系下TRAF6信號通路的影響 141
5.4.5  麥胚活性肽ADW對老年骨質(zhì)疏松大鼠TRAF6信號    通路的影響 143
5.4.6  麥胚活性肽ADW對老年骨質(zhì)疏松大鼠破骨細(xì)胞分化的影響 143
本章小結(jié) 146
參考文獻(xiàn) 147
第6章  麥胚活性肽促進(jìn)傷口愈合的作用及其應(yīng)用 158
6.1  多肽促進(jìn)傷口愈合的研究現(xiàn)狀 158
6.2  麥胚活性肽YDW對巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞作用的研究 160
6.2.1  小肽分子量及純度 160
6.2.2  小肽YDW對巨噬細(xì)胞RAW 264.7炎癥反應(yīng)的影響 161
6.2.3  小肽YDW對成纖維細(xì)胞L929活性的影響 165
6.2.4  小肽YDW對角質(zhì)形成細(xì)胞HaCaT活性的影響 169
6.3  麥胚活性肽對大鼠傷口愈合作用 172
6.3.1  小肽YDW對大鼠傷口愈合率的影響 172
6.3.2  小肽YDW對大鼠傷口組織中NO的影響 173
6.3.3  小肽YDW對大鼠傷口組織中炎癥因子的影響 174
6.3.4  大鼠傷口組織的病理學(xué)分析 176
6.3.5  大鼠傷口組織的免疫熒光分析 177
6.4  麥胚活性肽乳膏的制備及檢測 179
6.4.1  乳膏組成優(yōu)化 179
6.4.2  小肽YDW乳膏基本性質(zhì) 181
本章小結(jié) 192
參考文獻(xiàn) 193
第7章  麥胚活性肽對DSS誘導(dǎo)小鼠結(jié)腸炎的改善作用及機(jī)制 195
7.1  潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機(jī)制和研究現(xiàn)狀 195
7.2  麥胚蛋白質(zhì)體外模擬消化活性肽的篩選及其對脂多糖誘導(dǎo)的RAW 264.7細(xì)胞的抗炎作用 196
7.2.1  麥胚蛋白質(zhì)體外模擬消化過程中水解度的變化 196
7.2.2  超濾膜分離和多肽含量 197
7.2.3  麥胚抗炎活性肽的篩選 197
7.2.4  Nano-LC-MS/MS鑒定WGPH-Ⅲ（＜1kDa）多肽序列 199
7.2.5  麥胚活性肽P1、P2、P3和P4分別對LPS誘導(dǎo)的RAW 264.7細(xì)胞NO分泌量的影響 201
7.2.6  麥胚活性肽P1對LPS誘導(dǎo)的RAW?264.7細(xì)胞炎癥介質(zhì)的影響 202
7.2.7  麥胚活性肽P1對RAW 264.7細(xì)胞PKCζ-NF-κB信號通路蛋白表達(dá)的影響 203
7.3  麥胚活性肽對DSS誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎緩解作用 206
7.3.1  麥胚活性肽P1干預(yù)后結(jié)腸炎小鼠疾病活動指數(shù)（DAI） 206
7.3.2  麥胚活性肽P1干預(yù)后對結(jié)腸炎小鼠體重的影響 207
7.3.3  麥胚活性肽P1干預(yù)后對結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸的影響 208
7.3.4  麥胚活性肽P1干預(yù)后對結(jié)腸炎小鼠脾臟指數(shù)的影響 209
7.3.5  麥胚活性肽P1干預(yù)后對結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸組織病變的影響 209
7.3.6  麥胚活性肽P1干預(yù)后對血清中炎癥因子（IL-1β、IL-6及TNF-α）和結(jié)腸組織中MPO活性的影響 211
7.3.7  麥胚活性肽P1干預(yù)后對結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸組織中腸屏障功能的影響 212
7.3.8  麥胚活性肽P1干預(yù)后對結(jié)腸組織中PKCζ-NF-κB信號通路相關(guān)蛋白質(zhì)表達(dá)的影響 212
7.4  麥胚活性肽對DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎小鼠腸道菌群的影響 215
7.4.1  測序數(shù)據(jù)基本信息和質(zhì)量控制 215
7.4.2  α多樣性分析 216
7.4.3  麥胚活性肽P1對結(jié)腸炎小鼠腸道菌群物種組成的影響 217
7.4.4  基于Uni Firac的多樣品相似度樹分析 218
7.4.5  麥胚活性肽P1對不同水平的菌群相對豐度影響 219
7.4.6  腸道菌群優(yōu)勢屬與生理生化水平的相關(guān)性 226
本章小結(jié) 228
參考文獻(xiàn) 
附錄  縮略詞表 233