高寒草原牧草根際促生菌資源篩選及促生機理研究

1 緒論1
1.1 研究背景1
1.1.1研究區(qū)概況1
1.1.2研究的目的與意義3
1.1.3研究內容與技術路線5
1.2植物根際促生菌（PGPR）的國內外研究現(xiàn)狀7
1.2.1PGPR的概念及種類7
1.2.2PGPR的促生特性8
1.2.3PGPR菌株對植物的促生作用17
1.2.4溶磷微生物溶磷機理研究19
2 植物根際土壤理化性質和細菌數(shù)量及分布特征的研究23
2.1材料與方法24
2.1.1樣地概況24
2.1.2樣品采集24
2.1.3植物根際土壤理化性質測定25
2.1.4植物根際細菌數(shù)量測定25
2.1.5數(shù)據(jù)處理27
2.2結果與分析27
2.2.1植物根際土壤理化特征27
2.2.2植物根際土壤細菌的數(shù)量及分布29
2.2.3植物根際土壤養(yǎng)分含量對根際細菌數(shù)量的影響30
2.3討論31
2.4小結32
3 植物根際PGPR菌株的分離與純化33
3.1材料與方法34
3.1.1材料34
3.1.2培養(yǎng)基34
3.1.3固氮菌的分離與純化36
3.1.4溶磷菌的分離與純化36
3.1.5數(shù)據(jù)處理36
3.2結果與分析37
3.2.1植物根際固氮菌的數(shù)量及分布37
3.2.2植物根際溶解無機磷菌株的數(shù)量及分布37
3.2.3植物根際溶解有機磷菌株的數(shù)量及分布38
3.2.4植物根際PGPR菌株的分布38
3.3討論39
3.4小結40
4 優(yōu)良PGPR菌株的篩選及促生特性研究41
4.1材料與方法42
4.1.1供試菌株42
4.1.2 PGPR菌株促生特性研究42
4.1.3 優(yōu)良PGPR菌株的保藏48
4.1.4數(shù)據(jù)處理48
4.2結果與分析48
4.2.1PGPR菌株的固氮酶活性48
4.2.2PGPR菌株的溶磷能力50
4.2.3PGPR菌株的分泌 IAA 特性54
4.2.4優(yōu)良PGPR菌株的特點56
4.3討論57
4.4小結60
5 優(yōu)良PGPR菌株的鑒定61
5.1材料與方法62
5.1.1供試菌株62
5.1.2菌株菌落特征的觀察62
5.1.3菌株的革蘭氏染色63
5.1.4菌株的16S rDNA鑒定63
5.1.5 數(shù)據(jù)處理65
5.2結果與分析66
5.2.1優(yōu)良PGPR菌株的菌落形態(tài)特征66
5.2.2優(yōu)良PGPR菌株的革蘭氏染色66
5.2.3優(yōu)良PGPR菌株16S rDNA的PCR擴增67
5.2.4優(yōu)良PGPR菌株16S rDNA 序列測定68
5.2.5優(yōu)良PGPR菌株16S rDNA 序列比對及系統(tǒng)進化樹的繪制68
5.3討論73
5.4小結74
6 PGPR菌株植物根際定殖能力及接種效應研究75
6.1材料與方法76
6.1.1供試菌株76
6.1.2供試植物76
6.1.3接菌劑的制備及質量檢測77
6.1.4優(yōu)良PGPR菌株接種效應研究77
6.1.5優(yōu)良PGPR菌株植物根際定殖能力研究80
6.1.6數(shù)據(jù)處理81
6.2結果與分析81
6.2.1PGPR接菌劑質量檢測81
6.2.2PGPR接菌劑的試管接種效應82
6.2.3PGPR接菌劑盆栽接種效應93
6.2.4PGPR菌株在披堿草根際的定殖能力97
6.3討論98
6.4小結99
7 優(yōu)良溶磷菌溶磷機理的研究102
7.1材料與方法103
7.1.1供試菌株103
7.1.2培養(yǎng)基103
7.1.3實驗設計104
7.1.4菌株溶磷動態(tài)測定104
7.1.5菌株培養(yǎng)液pH值測定105
7.1.6菌株培養(yǎng)液蔗糖酶活性測定105
7.1.7菌株培養(yǎng)液磷酸酶活性測定106
7.1.8菌株培養(yǎng)液有機酸種類及含量的測定107
7.1.9數(shù)據(jù)處理108
7.2結果與分析108
7.2.1菌株溶磷動態(tài)108
7.2.2溶磷量與菌株培養(yǎng)液pH值的相關性110
7.2.3溶磷量與菌株培養(yǎng)液蔗糖酶活性的相關性112
7.2.4溶磷量與菌株培養(yǎng)液磷酸酶活性的相關性115
7.2.5菌株培養(yǎng)液有機酸的種類及含量116
7.2.6菌株溶磷途徑的綜合分析121
7.3討論122
7.4小結125
8 結論與展望
8.1主要結論127
8.2創(chuàng)新點130
8.3存在問題131
8.4研究展望131
附錄 部分PGPR珠菌16S rDNA堿基序列133
參考文獻150