生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程

第一章　核酸提取
第一節(jié)　基因組DNA的制備
一、制備植物細(xì)胞基因組DNA
二、制備動物細(xì)胞基因組DNA
三、制備細(xì)菌基因組DNA
四、制備酵母基因組DNA（以Pichia pastoris基因組DNA提取為例）
五、結(jié)果分析
六、基因組DNA提取注意事項(xiàng)
第二節(jié)　RNA的制備
一、動物物RNA提取（以人臍帶組織總RNA的抽提為例）
二、植物RNA的分離
三、綠色葉片植物葉線粒體RNA的分離
四、酵母RNA分離
五、酵母tRNA制備（苯酚法）
六、細(xì)菌RNA分離
七、結(jié)果分析
第三節(jié)　質(zhì)粒DNA制備
一、大腸桿菌質(zhì)粒DNA制備（堿裂解法）
二、農(nóng)桿菌質(zhì)粒DNA提取
三、結(jié)果分析
第二章　cDNA文庫構(gòu)建
第一節(jié)　應(yīng)用常規(guī)方法構(gòu)建cDNA文庫
一、原理
二、cDNA第一條鏈的合成
三、cDNA第二條鏈的合成
四、補(bǔ)平cDNA鏈末端
五、cDNA甲基化
六、cDNA與接頭或銜接子相連接
七、凝膠過濾分離cDNA
八、cDNA與入噬菌體臂的連接
九、重組子的篩選與鑒定
　第二節(jié)　構(gòu)建cDNA文庫新方法
　一、減數(shù)cDNA文庫
二、標(biāo)準(zhǔn)化cDNA文庫
第三節(jié)　cDNA文庫構(gòu)建及應(yīng)用實(shí)例
一、主要材料
二、實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)
三、結(jié)果及分析
第三章 已知目標(biāo)DNA片段的獲取
第一節(jié)　PCR法擴(kuò)增目標(biāo)DNA片段
一、原理
二、PCR條件
三、引物設(shè)計(jì)原則
四、PCR反應(yīng)特點(diǎn)
五、試劑
六、溫度與時(shí)間的設(shè)置
七、PCR擴(kuò)增效果的檢查
八、注意事項(xiàng)
九、用PCR擴(kuò)增目標(biāo)基因?qū)嵗?br /> 十、PCR技術(shù)擴(kuò)展
　第二節(jié)　基因的化學(xué)合成
一、磷酸二酯法
二、磷酸三酯法
三、固相亞磷酸三酯法
四、用寡核苷酸片段組裝
第四章 已知部分序列的DNA片段的獲取
第一節(jié) RACE
一、5’RACE
二、3’RACE
三、RACE方案的PCR優(yōu)化
四、RACE應(yīng)用實(shí)例
第二節(jié)　染色體步移
一、原理
二、材料
三、實(shí)驗(yàn)操作
第三節(jié)　反向PCR
一、原理
二、材料
三、實(shí)驗(yàn)操作
四、反向PCR應(yīng)用實(shí)例
第四節(jié)　錨定PCR
一、原理
　……
第五章　未知DNA片段的獲取　
第六章　RNAi技術(shù)
第七章　DNA重組
第八章　生產(chǎn)重組蛋白
第九章　純化技術(shù)
第十章　電泳技術(shù)
第十一章　雜交技術(shù)
第十二章　生物質(zhì)譜技術(shù)
第十三章　生物芯片
第十四章　噬菌體展示技術(shù)
第十五章　生命大分子相互作用分析
第十六章　生物信息學(xué)概況及生物信息數(shù)據(jù)庫