工業(yè)微生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)手冊(cè)

    第一章 顯微技術(shù)
    第一節(jié) 顯微鏡的種類、特點(diǎn)和使用
    一、明視野光學(xué)顯微鏡
    〔實(shí)驗(yàn)1－1〕明視野顯微鏡的使用
    二、其他光學(xué)顯微鏡
    〔實(shí)驗(yàn)1－2〕暗視野顯微鏡的使用
    〔實(shí)驗(yàn)1－3〕相差顯微鏡的使用
    〔實(shí)驗(yàn)1－4］熒光顯微鏡的使用
    三、電子顯微鏡
    〔實(shí)驗(yàn)1－5］質(zhì)粒DNA的透射電鏡觀察
    〔實(shí)驗(yàn)1－6〕酵母細(xì)胞的掃描電鏡觀察
    第二節(jié)顯微攝影
    ［實(shí)驗(yàn)1－7］顯微攝影菌落攝影和凝肢攝影
    第三節(jié)放射自顯影
    實(shí)驗(yàn)1－8］硝酸纖維素濾紙上標(biāo)記DNA的放射自顯影
   第二章 工業(yè)微生物基本形態(tài)及觀察
    第一節(jié) 細(xì)菌
    ［實(shí)驗(yàn)2－1］細(xì)菌形態(tài)的觀察
    第二節(jié) 放線菌
    〔實(shí)驗(yàn)2－2］放線菌的形態(tài)觀察
    第三節(jié) 噬菌體
    ［實(shí)驗(yàn)2－3〕噬菌體的分離與純化
    〔實(shí)驗(yàn)2－4］高效價(jià)噬菌體原液的制備
    〔實(shí)驗(yàn)2－5］溶源菌的鑒定
    第四節(jié) 酵母菌
    〔實(shí)驗(yàn)2－6］酵母菌細(xì)胞形態(tài)觀察
    〔實(shí)驗(yàn)2－7］酵母菌巨大菌落觀察
    第五節(jié) 小型絲狀真菌（霉菌）
    一、藻狀菌（主要指根霉、毛霉）
    〔實(shí)驗(yàn)2－3］根霉毛霉的形態(tài)觀察
    二、曲霉
    三、青霉
    〔實(shí)驗(yàn)2－9］青霉曲霉的形態(tài)觀察
    四、其他霉菌
    第六節(jié) 食用真菌
    〔實(shí)驗(yàn)2－10］平菇的瓶栽
   第三章 工業(yè)微生物細(xì)胞一般結(jié)構(gòu)與特殊結(jié)構(gòu)的觀察
    第一節(jié) 染色技術(shù)
    一、染色的基本原理
    二、染料
    三、染色種類
    〔實(shí)驗(yàn)3－1〕革蘭氏鑒別染色法
    〔實(shí)驗(yàn)3－2］活體染色法
    〔實(shí)驗(yàn)3－3］單染色法
    〔實(shí)驗(yàn)3－4］假絲酵母負(fù)染色法
    〔實(shí)驗(yàn)3－5］枯草芽孢桿菌的抗酸性染色
    〔實(shí)驗(yàn)3－6］真菌的熒光染色與觀察
    第二節(jié) 細(xì)胞各部結(jié)構(gòu)成分的分離與觀察
    〔實(shí)驗(yàn)3－7］革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞壁的制備
    〔實(shí)驗(yàn)3－8］酵母細(xì)胞壁甘露聚糖的制備
    〔實(shí)驗(yàn)3－9］細(xì)胞壁的形態(tài)觀察
    〔實(shí)驗(yàn)3－10］革蘭氏陰性菌細(xì)胞外膜蛋白的分離
    〔實(shí)驗(yàn)3－11〕細(xì)胞莢膜的觀察
    〔實(shí)驗(yàn)3－12〕細(xì)菌鞭毛的觀察
    〔實(shí)驗(yàn)3－13〕微生物細(xì)胞核的觀察
    ［實(shí)驗(yàn)3－14〕細(xì)菌染色體DNA的分離與觀察
    〔實(shí)驗(yàn)3－15〕異染顆粒的觀察·
    〔實(shí)驗(yàn)3－16］酵母細(xì)胞內(nèi)脂肪顆粒和肝糖顆粒的觀察
    〔實(shí)驗(yàn)3－17］酵母液泡及線粒體的提取
    第三節(jié) 芽孢、子囊孢子和假菌絲的觀察
    一、芽孢
    〔實(shí)驗(yàn)3－18〕細(xì)菌芽孢形成及發(fā)芽的觀察
    二、酵母子囊孢子
    〔實(shí)驗(yàn)3－19〕酵母子囊孢子的形成及觀察
    三、酵母假菌絲
    〔實(shí)驗(yàn)3－20〕酵母假菌絲的觀察
   第四章 工業(yè)微生物純培養(yǎng)技術(shù)
    第一節(jié) 消毒與滅菌
    一、熱殺菌
    二、化學(xué)消毒劑
    三、紫外線和射線
    四、接種室的空氣滅菌
    五、過濾除菌
    〔實(shí)驗(yàn)4－1〕微孔濾膜濾器的使用
    六、防霉劑
    〔實(shí)驗(yàn)4－2〕防霉劑的選用
    第二節(jié) 培養(yǎng)基及其制備
    一、培養(yǎng)基
    二、培養(yǎng)基成分的說明
    〔實(shí)驗(yàn)4－3］麥芽汁培養(yǎng)基的配制
    第三節(jié) 分離、接種和培養(yǎng)技術(shù)
    一、分離
    ［實(shí)驗(yàn)4－4］試管傾倒培養(yǎng)皿分離法
    ［實(shí)驗(yàn)4－5］平皿劃線分離法
    ［實(shí)驗(yàn)4－6］稀釋分離平皿菌落計(jì)數(shù)
    　二、顯微操作技術(shù)用于單細(xì)胞分離
    　 〔實(shí)驗(yàn)4－7〕顯微操縱器用于單細(xì)胞分離
    　 〔實(shí)驗(yàn)4－8］顯微操縱器用于酵母子囊的解剖及子囊孢子孢化
    三、接種
    〔實(shí)驗(yàn)4－9］接種技術(shù)
    四、搖瓶與發(fā)酵
    〔實(shí)驗(yàn)4－10］搖瓶發(fā)酵生產(chǎn)檸檬酸
    〔實(shí)驗(yàn)4－11〕小型連續(xù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn)
    ［實(shí)驗(yàn)4－12］釀酒酵母的同步培養(yǎng)
    〔實(shí)驗(yàn)4－13〕厭氧罐分離培養(yǎng)厭氧微生物
   第五章 培養(yǎng)條件對(duì)工業(yè)微生物生長與發(fā)酵的影響
    第一節(jié) 溫度
    〔實(shí)驗(yàn)5－1〕酵母營養(yǎng)細(xì)胞致死時(shí)間的測(cè)定
    第二節(jié) 水活度與滲透壓
    〔實(shí)驗(yàn)5－2］培養(yǎng)基中糖和鹽濃度對(duì)微生物生長的影響
    第三節(jié) 氧氣和氧化還原電位
    〔實(shí)驗(yàn)5－3］微生物生長對(duì)氧的要求
    〔實(shí)驗(yàn)5－4〕培養(yǎng)液氧化還原值（rH）的測(cè)定
    第四節(jié) 酸堿度
    〔實(shí)驗(yàn)5－5］pH對(duì)微生物的影響
    第五節(jié) 重金屬和一些化合物對(duì)微生物的抑制作用
    〔實(shí)驗(yàn)5－6］濾紙片法測(cè)定重金屬對(duì)微生物的影響
    〔實(shí)驗(yàn)5－7］消毒劑殺菌力的測(cè)定
    第六節(jié) 表面張力
    〔實(shí)驗(yàn)5－8〕表面張力對(duì)微生物的影響
    第七節(jié) 極端環(huán)境因素對(duì)微生物的影響
   第六章 工業(yè)微生物的生理與發(fā)酵試驗(yàn)
    第一節(jié) 微生物對(duì)碳源的利用
    〔實(shí)驗(yàn)6－1］細(xì)菌對(duì)糖、醇及糖苷的利用
    〔實(shí)驗(yàn)6－2］酵母對(duì)糖類的發(fā)酵
    第二節(jié) 微生物對(duì)氮源的利用
    〔實(shí)驗(yàn)6－3］細(xì)菌對(duì)硝酸鹽的還原作用
    ［實(shí)驗(yàn)6－4］酵母對(duì)氮素源的利用
    第三節(jié) 細(xì)菌簽定中的某些特殊生理實(shí)驗(yàn)
    〔實(shí)驗(yàn)6－5］淀粉水解
    〔實(shí)驗(yàn)6－6］V－P試驗(yàn)
    〔實(shí)驗(yàn)6－7］硫化氫的生成
    〔實(shí)驗(yàn)6－8〕吲哚試驗(yàn)
    〔實(shí)驗(yàn)6－9］過氧化氫酶的產(chǎn)生
    〔實(shí)驗(yàn)6－10〕明膠液化試驗(yàn)
    〔實(shí)驗(yàn)6－11〕石蕊牛乳試驗(yàn)
    〔實(shí)驗(yàn)6－12〕甲基紅試驗(yàn)（M－R）
    ［實(shí)驗(yàn)6－13〕乙醇的氧化
    〔實(shí)驗(yàn)6－14〕乙酸的氧化
    〔實(shí)驗(yàn)6－15〕脲酶的測(cè)定
    第四節(jié) 常用細(xì)菌的分離和檢測(cè)
    ［實(shí)驗(yàn)6－16］枯草桿菌
    〔實(shí)驗(yàn)6－17〕醋酸細(xì)菌
    〔實(shí)驗(yàn)6－18〕乳酸菌
    ［實(shí)驗(yàn)6－19〕德氏乳酸桿菌
    〔實(shí)驗(yàn)6－20〕丙酸細(xì)菌
    ［實(shí)驗(yàn)6－21〕丁酸細(xì)菌
    第五節(jié) 酵母應(yīng)用特性的測(cè)定
    〔實(shí)驗(yàn)6－22〕酵母發(fā)酵力的測(cè)定
    〔實(shí)驗(yàn)6－23〕壓榨酵母發(fā)酵力的測(cè)定
    ［實(shí)驗(yàn)6－24〕面包酵母發(fā)面力的測(cè)定
    〔實(shí)驗(yàn)6－25〕酵母忍耐酒精濃度的測(cè)定
    〔實(shí)驗(yàn)6－26］酵母抵抗防腐劑能力的測(cè)定
    ［實(shí)驗(yàn)6－27〕啤酒酵母凝絮力的測(cè)定
    〔實(shí)驗(yàn)6－28〕啤酒酵母產(chǎn)生雙乙酰的測(cè)定
    第六節(jié) 發(fā)酵制品的試驗(yàn)
    〔實(shí)驗(yàn)6－29〕細(xì)菌液化型淀粉酶的發(fā)酵及活力測(cè)定
    附：液化型淀粉酶活力的測(cè)定方法（部頒標(biāo)準(zhǔn)）
    ［實(shí)驗(yàn)6－30〕曲霉的葡萄糖淀粉酶生成和活力測(cè)定
    附：糖化型淀粉酶活力的測(cè)定方法（部頒標(biāo)準(zhǔn)）
    〔實(shí)驗(yàn)6－31〕米曲霉的蛋白酶生成及活力測(cè)定
    附：蛋白酶活力的測(cè)定方法〔部頒標(biāo)準(zhǔn)〕
    〔實(shí)驗(yàn)6－32〕纖維素酶的發(fā)酵及其活力測(cè)定
    〔實(shí)驗(yàn)6－33〕乳酸發(fā)酵及測(cè)定
    附：乳酸的比色測(cè)定法
    〔實(shí)驗(yàn)6－34〕乳酸菌飲料
    〔實(shí)驗(yàn)6－35〕葡萄酒飲料
    〔實(shí)驗(yàn)6－36〕發(fā)酵法釀制食醋
   第七章 發(fā)酵過程及發(fā)酵食品中微生物的檢測(cè)
    第一節(jié) 微生物生長、大小和數(shù)量的檢測(cè)方法
    一、細(xì)胞質(zhì)量測(cè)定
    二、細(xì)胞菌數(shù)測(cè)定法
    〔實(shí)驗(yàn)7－1〕酵母細(xì)胞數(shù)的測(cè)定
    〔實(shí)驗(yàn)7－2］酵母細(xì)胞大小的測(cè)定
    〔實(shí)驗(yàn)7－3］細(xì)菌增殖曲線的測(cè)定
    〔實(shí)驗(yàn)卜4］絲狀真菌生長速率的測(cè)定
    第二節(jié) 發(fā)酵和食品工業(yè)中常見的微生物種類及其概測(cè)
    一、發(fā)酵和食品工業(yè)中常見微生物的種類
    二、發(fā)酵和食品工業(yè)中常見微生物類屬檢索表
    三、發(fā)酵和食品工業(yè)中常見微生物類別的概測(cè)
    第三節(jié) 發(fā)酵和食品工業(yè)用水和發(fā)酵過程微生物數(shù)量
    的檢測(cè)
    一、發(fā)酵和食品工業(yè)用水微生物數(shù)量的測(cè)定
    〔實(shí)驗(yàn)7－5］水中細(xì)菌數(shù)的測(cè)定
    〔實(shí)驗(yàn)7－6］水中大腸菌群數(shù)量的測(cè)定
    〔實(shí)驗(yàn)7－7〕水中大腸桿菌數(shù)量的測(cè)定
    ［實(shí)驗(yàn)7－8］大腸桿菌的簡易檢出法
    二、酒醅中微生物總數(shù)測(cè)定
    ［實(shí)驗(yàn)7－9］酒醅中微生物數(shù)量的測(cè)定
    ［實(shí)驗(yàn)7－10〕固態(tài)發(fā)酵水漿厭氧微生物的分離
    第四節(jié) 培養(yǎng)皿或試管中菌落總數(shù)的確定
    第五節(jié) 免疫學(xué)技術(shù)
    一、免疫學(xué)中的基本概念及原理
    二、抗體的制備
    〔實(shí)驗(yàn)7－11〕乳化抗原的制備
    〔實(shí)驗(yàn)7－12〕動(dòng)物的免疫
    〔實(shí)驗(yàn)7－13〕兔抗血清的收集
    〔實(shí)驗(yàn)7－14〕雜交瘤與單克隆抗體的制備
    三、抗體的純化及標(biāo)記
    〔實(shí)驗(yàn)7－15］抗血清中l(wèi)gG抗體的純化
    〔實(shí)驗(yàn)7－16〕辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記抗體IgG的制
    〔實(shí)驗(yàn)7－17〕熒光抗體的制備
    四、凝集反應(yīng)
    〔實(shí)驗(yàn)7－18］玻片凝集試驗(yàn)
    〔實(shí)驗(yàn)7－19〕試管凝集試驗(yàn)
    〔實(shí)驗(yàn)7－20〕反向間接血凝試驗(yàn)
    五、沉淀反應(yīng)
    〔實(shí)驗(yàn)7－21〕單相免疫擴(kuò)散法
    〔實(shí)驗(yàn)7－22〕雙相免疫擴(kuò)散法
    六、酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)
    〔實(shí)驗(yàn)7－23〕夾心ELISA
    七、免疫熒光試驗(yàn)
    〔實(shí)驗(yàn)7－24〕間接免疫熒光試驗(yàn)
    八、免疫膠體金技術(shù)
    ［實(shí)驗(yàn)7－25］免疫膠體金試驗(yàn)
    九、免疫轉(zhuǎn)移電泳
    〔實(shí)驗(yàn)7－26〕免疫轉(zhuǎn)移電泳法
    第六節(jié) 分子生物學(xué)技術(shù)
    一、GC含量測(cè)定
    〔實(shí)驗(yàn)7－27〕熱變性溫度法測(cè)定GC含量
    二、聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)
    〔實(shí)驗(yàn)7－28〕SDS－PAGE
    〔實(shí)驗(yàn)7－29〕聚丙烯酰胺凝膠的等電聚焦電泳
    三、色譜技術(shù)
    〔實(shí)驗(yàn)7－30〕離子交換色譜技術(shù)
    〔實(shí)驗(yàn)7－31〕凝膠過濾色譜技術(shù)
    ［實(shí)驗(yàn)7－32〕Sepharose4B溴化氰偶聯(lián)技術(shù)
    ［實(shí)驗(yàn)卜33〕Sephadex過碘酸鈉偶聯(lián)技術(shù)
    ［實(shí)驗(yàn)7－34〕親和色譜技術(shù)
    四、核酸分子雜交技術(shù)
    （一）同位素標(biāo)記探針的制備
    〔實(shí)驗(yàn)7－35〕缺口平移法制備DNA探針
    〔實(shí)驗(yàn)7－36〕隨機(jī)引物標(biāo)記法
    〔實(shí)驗(yàn)7－37］RNA探針的制備
    （二）非同位素標(biāo)記核酸探針的制備
    〔實(shí)驗(yàn)7－38〕Dig－核酸探針的制備
    〔實(shí)驗(yàn)7－39〕光敏生物素標(biāo)記核酸探針的制備
    （三）待檢樣固相化
    〔實(shí)驗(yàn)7－40〕凝膠中DNA轉(zhuǎn)移至硝酸纖維膜（Southern
    blOt）
    〔實(shí)驗(yàn)7－41〕菌落原位雜交
    （四）硝酸纖維膜上DNA原位雜交
    〔實(shí)驗(yàn)7－42〕放射性同位素標(biāo)記核酸探針的雜交
    〔實(shí)驗(yàn)7－43〕地高辛標(biāo)記核酸探針的雜交及顯色
    〔實(shí)驗(yàn)7－44〕生物素標(biāo)記核酸探針的雜交及顯色
    五、聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)（PCR）
    〔實(shí)驗(yàn)7－45〕PCR技術(shù)
    第七節(jié) 沙門氏菌和志賀氏菌的檢測(cè)
    〔實(shí)驗(yàn)7－46〕沙門氏菌和志賀氏菌的檢驗(yàn)
   第八章 選種和育種
    第一節(jié) 工業(yè)菌種篩選程序
    一、采樣
    二、增殖培養(yǎng)
    三、培養(yǎng)分離
    四、篩選
    五、毒性試驗(yàn)
    第二節(jié) 培養(yǎng)分離
    一、自然界中細(xì)菌的分離
    （一）采樣和采集方法
    （二）生態(tài)學(xué)參數(shù)及培養(yǎng)基的組成原則
    （三）分離培養(yǎng)基及試液
    （四）土中細(xì)菌的分離
    〔實(shí)驗(yàn)8－1〕土中細(xì)菌的直接分離
    〔實(shí)驗(yàn)8－2］土中細(xì)菌的富集培養(yǎng)與分離
    （五）植物體上細(xì)菌的分離
    〔實(shí)驗(yàn)8－3］植物體上細(xì)菌的直接分離
    〔實(shí)驗(yàn)8－4］植物體上細(xì)菌的富集培養(yǎng)及分離
    （六）水中細(xì)菌的分離
    〔實(shí)驗(yàn)8－5］水中細(xì)菌的直接分離
    〔實(shí)驗(yàn)8－6］水中細(xì)菌的濾膜壓印分離法
    （七）次代培養(yǎng)及純化
    二、放線菌的分離
    （一）采樣及采集方法
    （二）生態(tài)學(xué)參數(shù)和培養(yǎng)基的組成原則
    （三）放線菌分離培養(yǎng)基及試液
    （四）土樣中放線菌的分離
    〔實(shí)驗(yàn)8－7］土樣中放線菌的非選擇性分離
    （五）植物及植物材料上放線菌的分離
    〔實(shí)驗(yàn)8－8］植物體上放線菌的分離
    （六）植物體上放線菌分離的餌誘法
    〔實(shí)驗(yàn)8－9］餌誘法分離植物體上的放線菌
    （七）水中放線菌的分離
    （八）次代培養(yǎng)及純化
    三、真菌分離
    （一）采樣及采集方法
    （二）生態(tài)學(xué)參數(shù)及培養(yǎng)基組成原則
    （三）真菌培養(yǎng)分離常用培養(yǎng)基及試液
    （四）土中真菌的分離
    〔實(shí)驗(yàn)8－10］土樣中真菌的壓貼分離
    （五）植物材料中真菌的分離
    （六）水中真菌的分離
    （七）從子實(shí)體直接分離培養(yǎng)擔(dān)子菌
    〔實(shí)驗(yàn)8－11〕擔(dān)子菌組織分離法
    〔實(shí)驗(yàn)8－12］擔(dān)子菌孢子分離
    （八）植物組織中擔(dān)子菌的分離
    （九）次代培養(yǎng)及純化
    四、目標(biāo)菌株的分離、篩選及毒性試驗(yàn)
    〔實(shí)驗(yàn)8－13］利用堿法紙漿廢液的微生物的分離
    〔實(shí)驗(yàn)8－14〕葡萄酒酵母的篩選
    〔實(shí)驗(yàn)8－15〕生產(chǎn)選種
    〔實(shí)驗(yàn)8－16〕發(fā)酵廢液COD測(cè)定
    第三節(jié) 工業(yè)菌種的育種方針
    第四節(jié) 富集培養(yǎng)技術(shù)在育種中的應(yīng)用
    一、去調(diào)節(jié)突變株的富集
    二、營養(yǎng)缺陷型的富集
    三、富集法在研究次級(jí)代謝的重組DNA技術(shù)中的應(yīng)用
    第五節(jié) 誘變育種
    一、誘變劑和誘變處理
    二、誘變育種步驟
    〔實(shí)驗(yàn)8－17〕紫外線的誘變育種
    〔實(shí)驗(yàn)8－18］亞硝基胍誘變曲霉菌（黑曲霉、米曲霉）
    〔實(shí)驗(yàn)8－19〕鏈霉菌菌絲體的誘變育種
    第六節(jié) 營養(yǎng)缺陷型的選育
    一、誘變方法
    二、淘汰野生型
    三、檢出缺陷型
    四、營養(yǎng)缺陷型生長譜的確定
    〔實(shí)驗(yàn)8－20〕大腸桿菌營養(yǎng)缺陷型的篩選
    〔實(shí)驗(yàn)8－21〕酵母營養(yǎng)缺陷型的篩選
    〔實(shí)驗(yàn)8－22〕青霉菌營養(yǎng)缺陷型菌株的篩選
    第七節(jié) 呼吸缺陷型及代謝調(diào)節(jié)突變株的篩選
    〔實(shí)驗(yàn)8－23〕酵母呼吸缺陷型的篩選
    〔實(shí)驗(yàn)8－24〕氨基酸抗反饋調(diào)節(jié)突變株的選育
    第八節(jié) 抗噬菌體菌株的選育
    〔實(shí)驗(yàn)8－25〕抗噬菌體產(chǎn)α-淀粉酶菌株的選育
    第九節(jié) 基因育種
    一、質(zhì)粒的提取與純化
    〔實(shí)驗(yàn)8－26〕大腸桿菌質(zhì)粒DNA的提取
    〔實(shí)驗(yàn)8－27〕鏈霉菌質(zhì)粒DNA的分離與純化
    二、染色體DNA的提純
    〔實(shí)驗(yàn)8－28〕鏈霉菌染色體DNA的分離與純化
    ［實(shí)驗(yàn)8－29〕釀酒酵母染色體DNA的提取
    三、DNA和RNA的定量測(cè)定
    〔實(shí)驗(yàn)8－30〕DNA的定量測(cè)定
    四、遺傳轉(zhuǎn)化
    〔實(shí)驗(yàn)8－31］質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化感受態(tài)大腸桿菌
    〔實(shí)驗(yàn)8－32〕質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化啤酒酵母
    五、DNA的瓊脂糖凝膠電泳
    〔實(shí)驗(yàn)8－33〕質(zhì)粒DNA的瓊脂糖凝膠電泳
    六、DNA的聚丙烯酰胺凝膠電泳
    〔實(shí)驗(yàn)8－34〕DNA的聚丙烯酰胺凝膠電泳
    〔實(shí)驗(yàn)8－35〕從凝膠中回收純化DNA片段
    七、雜交育種
    （一）細(xì)菌雜交
    〔實(shí)驗(yàn)8－36〕細(xì)菌的接合
    （二）酵母雜交育種技術(shù)
    〔實(shí)驗(yàn)8－37〕酵母單倍體的分離與鑒定
    〔實(shí)驗(yàn)8－33］罕見交配法轉(zhuǎn)移酵母殺傷質(zhì)粒
    第十節(jié) 原生質(zhì)體育種
    一、原生質(zhì)體融合育種的特點(diǎn)
    二、原生質(zhì)體融合育種步驟
    三、原生質(zhì)體融合育種的要點(diǎn)
    四、原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化
    五、原生質(zhì)體再生率和融合率計(jì)算
    〔實(shí)驗(yàn)8－39〕芽孢桿菌的原生質(zhì)體融合
    〔實(shí)驗(yàn)8－40〕鏈霉菌屬原生質(zhì)體融合
    〔實(shí)驗(yàn)8－41〕小單胞菌的原生質(zhì)體融合
    〔實(shí)驗(yàn)8－42］酵母的原生質(zhì)體融合
    〔實(shí)驗(yàn)8－43］絲狀真菌的原生質(zhì)體融合
    〔實(shí)驗(yàn)8－44］芽孢桿菌屬間原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化
    〔實(shí)驗(yàn)8－45］質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化鏈霉菌原生質(zhì)體
    〔實(shí)驗(yàn)8－46］真菌原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化
    六、原生質(zhì)體技術(shù)中的一些特殊技術(shù)
    （一）供體原生質(zhì)體的熱滅活
    （二）供體原生質(zhì)體的紫外滅活
    （三）遺傳轉(zhuǎn)移
    〔實(shí)驗(yàn)8－47〕原生質(zhì)體融合法轉(zhuǎn)移酵母線粒體及殺傷質(zhì)粒
    （四）原生質(zhì)體誘變育種
    〔實(shí)驗(yàn)8－48〕紫外線誘變?cè)|(zhì)體選育蘇氨酸高產(chǎn)菌
    （五）原生質(zhì)體電融合技術(shù)
    〔實(shí)驗(yàn)8－49〕電誘導(dǎo)酵母原生質(zhì)體融合
    第十一節(jié) 基因工程技術(shù)用于工業(yè)菌種改良
    〔實(shí)驗(yàn)8－50〕耐熱α－淀粉酶基因的克隆和表達(dá)
   第九章 工業(yè)微生物菌種保藏技術(shù)
    第一節(jié) 冷凍保藏
    一、普通冷凍保藏技術(shù)
    二、超低溫冷凍保藏技術(shù)
    三、液氮冷凍保藏技術(shù)
    〔實(shí)驗(yàn)9－1］快速沙土管保藏法
    第二節(jié) 凍干保藏
    〔實(shí)驗(yàn)9－2］菌種冷凍干燥保藏
    第三節(jié) 其他保藏方法
    一、傳代保藏
    二、礦物油中浸沒保藏
    〔實(shí)驗(yàn)9－3］液體石蠟保藏菌種
    三、干燥－載體保藏
    第四節(jié) 基因工程菌的保藏
    第五節(jié) 微生物活力和穩(wěn)定性測(cè)定
    第六節(jié) 常用菌種保藏培養(yǎng)基
    第七節(jié) 菌種保藏機(jī)構(gòu)
   第十章 微生物細(xì)胞固定化方法
    第一節(jié) 載體結(jié)合法
    第二節(jié) 交聯(lián)法
    第三節(jié) 包埋法
    一、藻酸鈣凝膠包埋法
    ［實(shí)驗(yàn)10－1〕釀酒酵母的藻酸鈣固定化
    二、k－角叉膠包埋法
    〔實(shí)驗(yàn)10－2］一步法k－角叉膠細(xì)胞固定化
    〔實(shí)驗(yàn)10－3〕二步法k－角叉膠細(xì)胞固定化
    〔實(shí)驗(yàn)10－4〕固定化細(xì)胞的回收與活細(xì)胞計(jì)數(shù)
    三、聚丙烯酰胺凝膠包埋法
    〔實(shí)驗(yàn)10－5］大腸桿菌的聚丙烯酰胺凝膠固定化
    四、光交聯(lián)樹脂前聚體包埋法
    〔實(shí)驗(yàn)10－6］光交聯(lián)樹脂固定化原生質(zhì)體
    五、其他包埋方法
    （一）膠原包埋法
    （二）纖維素包埋法
    第四節(jié) 其他固定化方法
    第五節(jié) 固定化微生物細(xì)胞的應(yīng)用
    一、L－氨基酸生產(chǎn)
    二、抗生素生產(chǎn)
    三、有機(jī)酸生產(chǎn)
    四、醇類生產(chǎn)
    五、固定化細(xì)胞釀造啤酒
    六、食醋釀制
    〔實(shí)驗(yàn)10－7］固定化酵母連續(xù)生產(chǎn)酒精
    〔實(shí)驗(yàn)10－8］固定化枯草桿菌連續(xù)生產(chǎn)耐熱α-淀粉酶
   第十一章 酶固定化技術(shù)
    第一節(jié) 概述
    第二節(jié) 吸附法
    一、幾丁載體上酶的吸附固定
    〔實(shí)驗(yàn)11－1］吸附法幾個(gè)固定化酶的制備
    二、疏水吸附法
    〔實(shí)驗(yàn)11－2〕疏水吸附法固定化酶的制備
    三、親和吸附法
    〔實(shí)驗(yàn)11－3〕親和吸附法固定L－維生素C氧化酶
    〔實(shí)驗(yàn)11－4〕親和吸附交聯(lián)法固定蔗糖酶
    〔實(shí)驗(yàn)11－5〕葡萄糖氧化酶的免疫固定化
    四、過渡金屬介導(dǎo)法
    〔實(shí)驗(yàn)11－6〕過渡金屬介導(dǎo)葡萄糖淀粉酶固定于控孔玻璃
    〔實(shí)驗(yàn)11－7〕過渡金屬介導(dǎo)葡糖淀粉酶固定化改良法
    第三節(jié) 包埋法
    一、凝膠聚合包埋法
    二、輻射聚合包埋法
    〔實(shí)驗(yàn)11－8］輻射共聚合包埋法固定葡糖淀粉酶
    三、酶蛋白共聚合包埋法
    〔實(shí)驗(yàn)11－9〕酰化共聚合包埋法固定α－糜蛋白酶
    四、交聯(lián)多聚物凝膠包埋法
    〔實(shí)驗(yàn)11－－10］明膠交聯(lián)包埋法
    〔實(shí)驗(yàn)11－11〕明膠交聯(lián)法制備固定化雙酶膜
    〔實(shí)驗(yàn)11－12〕聚乙烯醇交聯(lián)包埋法
    〔實(shí)驗(yàn)11－13〕脫乙酰幾丁質(zhì)交聯(lián)包埋法
    五、移植共聚合包埋法
    〔實(shí)驗(yàn)11－14］移植共聚合包埋法
    六、物理定位法
    第四節(jié) 共價(jià)交聯(lián)法
    一、溴化氰交聯(lián)法
    〔實(shí)驗(yàn)11－1－5］溴化氰交聯(lián)滴定法
    〔實(shí)驗(yàn)11－16］三乙烯胺－澳化氰活化法
    〔實(shí)驗(yàn)11－17］溴化氰活化法制備可溶性載體固定化酶
    二、碳化二亞胺法
    〔實(shí)驗(yàn)11－18］碳化二亞胺二步法固定巰基氧化酶
    三、戊二醛交聯(lián)法
    〔實(shí)驗(yàn)11－19］戊二醛交聯(lián)固定化葡萄糖氧化酶
    四、交鏈聚乙烯亞胺法
    〔實(shí)驗(yàn)11－20］PEI裱涂載體的制備及用于酶固定化
    五、活性載體法
   第十二章 工業(yè)微生物實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理
    第一節(jié) 工業(yè)微生物實(shí)驗(yàn)室范圍與基本要求
    第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè)備
    第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)室大小及布局
    第四節(jié) 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理
    一、顯著性檢驗(yàn)法
    二、回歸分析法
    三方差分析
    四、正交試驗(yàn)法
    五、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理常用表格
   第十三章工業(yè)微生物實(shí)驗(yàn)室常見的一些單元操作技術(shù)
    第一節(jié) 攪拌和振蕩
    第二節(jié) 氣體的計(jì)量和導(dǎo)入
    第三節(jié) 加熱和冷卻
    第四節(jié) 減壓操作
    第五節(jié) 干燥
    第六節(jié) 過濾和離心
    第七節(jié) 簡單蒸餾
    第八節(jié) 紙層析
    第九節(jié) 薄層層析
    第十節(jié) 溶液的脫色
    第十一節(jié) 密度的測(cè)定
    第十二節(jié) 折光率
    第十三節(jié) 比旋光度
    第十四節(jié) 硅化
    第十五節(jié) 透析袋的準(zhǔn)備
    第十六節(jié) 天平的使用與維護(hù)
    第十七節(jié) 分光光度計(jì)波長的校正
   附錄
    一、實(shí)驗(yàn)室安全及防護(hù)知識(shí)
    二、實(shí)驗(yàn)室常識(shí)
    三玻璃器皿的洗滌及各種洗液的配制
    四、緩沖液
    五、一些有機(jī)物質(zhì)的性質(zhì)
    六、指示劑
    七、冷卻劑和吸水劑
    八、硫酸銨飽和度的常用表
    九、試劑的配制及一些常用數(shù)據(jù)表
    本書使用的英文縮寫
   主要參考資料